生活污水及屠宰、生物制品、醫(yī)院、制革、洗毛等工業(yè)廢水中常含有這些能傳染各種疾病的致病微生物。消毒殺菌的方法有氯、二氧化氯、臭氧等氧化法、紫外線照射等,另外超濾處理也可以除去水中大部分的細(xì)菌。對致病病原體較為集中和含量較大的污水好進行單獨消毒處理,然后再和其他污水一起進行二級生化處理,這樣可以減少消毒劑的消耗量。污水處理后排放和回用前通常需要進行消毒處理,需'要監(jiān)控的微生物指標(biāo)是細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)。
1.細(xì)菌總數(shù)
細(xì)菌總數(shù)是指lmL水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,經(jīng)37T、24h培養(yǎng)后所生長的菌落數(shù)。計量單位是每mL水中所含有的總菌數(shù),這是一種測定水中好氧和兼性厭氧的異養(yǎng)菌密度的方法。
(1)測定細(xì)菌總數(shù)的注意事項
每個水樣必須做兩個平行樣,另外每次檢驗還要做只傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的空白對照。培養(yǎng)之后,應(yīng)立即進行平皿菌落計數(shù)。如果計數(shù)必須暫緩進行,可將平皿存放于5~ [#]01的環(huán)境下,但不能超過24h,而且也不可以將這種做法當(dāng)做常規(guī)的操作方式。
對平皿菌落計數(shù)時,可用肉眼觀察,為防止遺漏,必要時應(yīng)用放大鏡檢查。對那些看來相似、距離相近但并不相觸的菌落,只要其距離小于小菌落的直徑,就應(yīng)當(dāng)分別予以計數(shù)。對那些緊密接觸但外觀(形態(tài)或顏色)有差異的菌落也要分別予以計數(shù)。
在求同一稀釋度的平均菌落數(shù)時,如果其中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的菌落數(shù)。如果片狀菌落不到平皿的一半、而其余部分菌落的分布又很均勻時,則可以將生長均勻的1/2平皿菌落計數(shù)后乘以2代表全皿菌落數(shù)。
細(xì)菌總數(shù)的測定結(jié)果是以每個平皿菌落總數(shù)或同一稀釋度平行實驗平皿的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。當(dāng)終結(jié)果在100以內(nèi)時按實際菌落數(shù)記錄結(jié)果;大于100時,采用兩位有效數(shù)字,用 [#]0的指數(shù)來表示,如果菌落數(shù)無法計數(shù),在報告結(jié)罘時要注明稀釋倍數(shù)。
(2)根據(jù)菌落計數(shù)結(jié)果計算水樣的細(xì)菌總數(shù)的方法
計算細(xì)菌總數(shù)的化驗結(jié)果時,需要根據(jù)不同稀釋度的平均菌落數(shù)進行比較和計算,其方法如下:
①首先選擇平均菌落數(shù)在30>300之間的情況進行計算,當(dāng)只用一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時,即以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)作為檢驗水樣細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果。
②如果有兩個稀釋度的平均菌落數(shù)在30~ [#]00之間,應(yīng)當(dāng)按二者的比值來決定計算方法。如果比值小于2,則以各自的平均菌落數(shù)乘以各自的稀釋倍數(shù)后的平均值作為檢驗水樣細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果;比值大于2,則以其中平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)后的較小者作為檢驗水樣細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果。
③如果所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應(yīng)當(dāng)按稀釋倍數(shù)大的平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)作為檢驗水樣細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果。
④如果所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)當(dāng)按稀釋倍數(shù)小的平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)作為檢驗水樣細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果。
⑤如果所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~ [#]00之間,則應(yīng)當(dāng)以接近30或300的平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)作為檢驗水樣細(xì)菌總數(shù)的結(jié)果。
2.大腸菌群數(shù)(值)
大腸菌群細(xì)菌是腸道好氧菌中普遍和數(shù)W:多的一類細(xì)菌,所以常將其作為糞便污染的指示菌。人體飲用或接觸大腸直群數(shù)超標(biāo)的水,就可能引起腸道傳染疾病。大腸菌群細(xì)菌是指-類好氧或兼性厭氧、能發(fā)酵乳糖、革蘭氏染色陰性、無芽孢的護菌,因此有時也稱糞大腸菌群或大腸桿菌,大腸菌群細(xì)菌在乳糖培養(yǎng)基中經(jīng)37尤、24h培養(yǎng)后,能產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大腸菌群數(shù)(值)-般以1L或lOOmL水中含有的大腸菌群數(shù)量為計量單位,常用測定方法有多管發(fā)酵法和濾膜法兩種。
多管發(fā)酵法是根據(jù)大腸菌群細(xì)菌能發(fā)酵乳糖、革蘭氏染色陰性、無芽孢、呈桿狀等有關(guān)特性,通過三個步驟進行檢驗,來確定水樣中的總大腸菌群數(shù)。多管發(fā)酵法以可能數(shù)MPN來表示實驗結(jié)果,是根據(jù)統(tǒng)計學(xué)理論估計水體中大腸桿菌密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法,這種估計有大于實際數(shù)字的傾向。對于大腸菌群數(shù)含量的估計值,決定于那些既顯示陽性又顯示陰性的稀釋度,在實際設(shè)計水樣檢驗所要求重復(fù)的數(shù)目時,要根據(jù)所要求數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度而定。
濾膜法是用特制的滅菌微孔薄膜過濾水樣,細(xì)菌被截留在膜上后,將薄膜貼在品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。因為大腸菌群細(xì)菌可發(fā)酵乳糖,在濾膜上培養(yǎng)培養(yǎng)后會出現(xiàn)紫紅色具有金屬光澤的菌落,計數(shù)濾膜上出現(xiàn)的具有此特征的菌落數(shù),即可計算出每L水樣中含有的大腸菌群數(shù)。濾膜法可測定的水樣體積較大,能比多管發(fā)酵法更快地獲得結(jié)果,但測定濁度高、非大腸桿菌類細(xì)菌密度大時,效果較差。
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